MEDICINA PERSONALIZADA PARA LAS DISTROFIAS MUSCULARES CONGÉNITAS: DESARROLLO Y VALIDACIÓN DE TRATAMIENTOS AVANZADOS PARA EL DÉFICIT DE COLÁGENO VI
RESUMEN DEL PROYECTO
Objetivo principal:
El propósito central de este proyecto es avanzar en la medicina personalizada para las Distrofias Musculares Congénitas por déficit de colágeno VI (COL6-RD) a través de tres ejes:
- La validación in vitro e in vivo de estrategias de edición génica (ASOs y editores de bases) desarrolladas previamente
- El diseño de nuevas herramientas dirigidas a mutaciones de «splicing»
- La investigación de nuevas dianas terapéuticas farmacológicas utilizando el modelo animal col6a1 Ki G292R.
Plan de trabajo y metodología:
El desarrollo del proyecto se divide en tres objetivos específicos con sus respectivas metodologías:
- Validación pre-clínica de estrategias terapéuticas para mutaciones puntuales:
Oligonucleótidos Antisentido (ASO) in vivo: Tras lograr la protección intelectual (PCT) de los ASOs candidatos, se validará su eficacia en el modelo de ratón col6a1 Ki G292R mediante inyecciones intramusculares e intravenosas. Se evaluará la biodistribución tisular y el silenciamiento del alelo mutado por «Splint» PCR y PCR digital, analizando la restauración del colágeno VI por Western Blot e Inmunofluorescencia, además de evaluar su perfil de toxicidad y biocompatibilidad.
Optimización de editores de bases (ABE8e) para la mutación c.877 G>A:A partir de la optimización del mRNA de editores de bases de adenina (que lograron incrementar un 30% el alelo sano y corregir el patrón de la matriz extracelular in vitro), se investigarán nuevas condiciones de transfección y nucleotransfección en fibroblastos para aumentar la tasa de corrección, controlando la genotoxicidad y efectos no deseados a nivel genómico.
Sistemas de administración (Delivery):Se continuará investigando el potencial de las nanopartículas lipídicas llamadas Quatsomas (QS) —que han demostrado capacidad para alcanzar distintos grupos musculares por vía intravenosa— en paralelo con otros agentes y LNPs comerciales mediante IVIS, citometría de flujo y PCR digital.
- Desarrollo de estrategias terapéuticas para mutaciones de «splicing»:
Se caracterizará detalladamente una mutación intrónica no descrita previamente (c.859-10T>A) que provoca la inclusión de un pseudoexón de 159 nucleótidos e interrumpe la triple hélice de la cadena alfa 1. Se generará un anticuerpo específico para detectar el pseudoexón se diseñarán ASOs y editores de bases dirigidos a modificar el splicing para reducir o eliminar su expresión.
- Estudio de dianas terapéuticas farmacológicas y mecanismos fisiopatológicos:
Dado que el modelo murino presenta un aumento de fibrosis en el diafragma a partir de los 2 meses de edad, se analizará la capacidad regenerativa muscular (induciendo daño con cardiotoxina) y la implicación de la vía del TGFβ (analizando marcadores como Smad3, fibronectina y periostina). El fin es determinar si estas alteraciones son universales en COL6-RD y validar el uso de fármacos anti-fibróticos complementarios a la terapia génica.
Hitos alcanzados y justificación:
Este proyecto da continuidad a resultados previos exitosos, destacando la protección intelectual mediante la patente PCT/EP2024/067949 para los ASOs diseñados, paso crítico para la traslación clínica y su futura aplicación en humanos. Además, se cuenta con metodologías ya puestas a punto para la edición génica con ABE8e y la vectorización con Quatsomas, asegurando la viabilidad técnica de la propuesta.
Duración del proyecto: 2025 – 2027 (2 años).
Lugar de desarrollo: Hospital Sant Joan de Déu (en colaboración con UCL Business Ltd, CIEMAT, ETH Zurich e ICMAB).
Investigadores implicados: Dra. Jimenez Mallebrera, Cecilia: Coordinadora Grupo de Investigación
Colaboradores: Dra. Paula Río (CIEMAT, Madrid) y Dr. Jacob E. Corn (ETH Zurich, Zúrich)
Presupuesto: 87.038,60 € (incluye 79.126 € de coste de personal para un ayudante de investigación a dedicación exclusiva y un 10% de gastos indirectos).